2015年12月7日星期一

顯微技術的改善揭示了對細胞過程的新理解


研究人員顯著提高了活細胞結構照明顯微術(SIM)金相顯微鏡的分辨率,SIM是與其它超分辨技術相比有許多好處的一類顯微術。其結果已經給人們就細胞過程提供了一個更為詳細的了解,且對健康研究具有重要的意義。目前,許多其它類型的超分辨顯微鏡都有缺陷;例如定位顯微術和受激發射損耗顯微術必須使用高強度的光照和熒光標記才能獲取圖像,而這會對活體細胞造成損害,即使是在短時間之後。SIM所用的照明強度水平要低得多,但到目前為止,它的分辨率一直限於衍射上限的兩倍。

為了提高SIM的分辨率,Dong Li等人用了一種較高數值孔徑(NA)的透鏡。較高的NA不僅將SIM的分辨率從100納米提高至84納米,而且將激發限制在細胞容量的一小部分,從而進一步降低了光毒性並消除了失焦的背景。在第二種方法中,該小組用處於某種波長的照明條紋來激活一個熒光蛋白亞組,並接著用處於第二種波長的條紋模式來誘導這些蛋白發射熒光。這兩種照明模式的結合可給出62納米的分辨率,這一分辨率比僅用一種模式所得到的分辨率要好得多。

研究人員接著用這些改善的分辨技術來獲取對細胞過程的新的了解。例如,研究界就肌動蛋白在網格蛋白介導的細胞內吞中所起的作用存在著某些爭論,但通過SIM分辨率的改善,Li等人能夠確認,顯微鏡肌動蛋白的存在增加了網格蛋白內化的概率。他們的研究還用這些新的分辨度對其它數種細胞過程進行了探索,並為蛋白互動提供了漂亮的圖像和卓越的細節。

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